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SFLO 全光谱流式应用方案(20 色):人外周血淋巴细胞亚群分型 II
  • j9游会真人游戏第一品牌医学 更新时间:

    2023-12-05

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人体免疫系统中存在大量的免疫细胞,它们能够精准识别并杀伤病毒、细菌等外来入侵者,并执行免疫监视功能,发现和清除体内出现的突变或衰老细胞,维持机体内环境的稳定,保障身体健康。一些疾病可以影响免疫细胞数目的增减,如患肺结核时,淋巴细胞有显著增加。因此,对外周血中免疫细胞进行分型、鉴定,是评估免疫功能和状态的重要方法。多色流式细胞术是一种通过流式细胞仪对单个细胞进行多参数、快速分析的生物医学检测技术,可以快速、准确地对细胞的成分、数量、状态、分化阶段等进行检测分析,是免疫精细分型的重要检测平台,帮助我们评估免疫状态和免疫功能。


1.Panel设计

本文使用SFLO3全光谱流式细胞仪分析新鲜健康人的 EDTA 抗凝全血样本的免疫细胞。通过20 色panel对CD4 T细胞和CD8 T细胞及相关亚群、调节性T细胞(Tregs、γδ T细胞、NKT细胞、B细胞、NK细胞和单核细胞、嗜碱性粒细胞进行分析。具体方案如下表所示,整个panel全部为表面标记,无需固定破膜染色,方案简单易行,轻松实现20个荧光素的同时标记。

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2.细胞分型结果

逻辑圈门

通过 SFLO 自带的CytoPysual分析软件进行手动圈门,具体策略如图1所示。

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图1 人外周血淋巴细胞亚群分型

(20色)方案逻辑圈门

高维数据分析


图2展示t-SNE分析淋巴细胞亚群的结果,计算机通过降维聚类,自动识别出13个细胞亚群,通过不同颜色进行标记区分,并在一张图中全部呈现,与手动圈门结果一致。

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图2 t-SNE分析人外周血淋巴细胞亚群分型


图3全面展示了淋巴细胞亚群中各个marker的表达情况。通过颜色的深浅直观地表示各个marker的强弱表达情况,颜色越亮,marker表达越强。

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图3 热图分析人外周血淋巴细胞亚群分型


3.实验结论

SFLO全光谱流式细胞仪可以在多色检测的同时,无需考虑通道之间的干扰,实现对细胞群体的精准免疫分型,分析细胞亚群之间的功能联系,以及对于大量样品进行高通量检测,适用于多种应用场景,为不同的研究需求提供强有力的工具。

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