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    SFLO全光谱流式应用方案:人外周血T/单核细胞亚群分型(11色)
    • j9游会真人游戏第一品牌医学 更新时间:

      2025-01-02

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    T/单核细胞亚群

    T细胞是机体淋巴细胞主要成分之一,临床上常用流式细胞术对外周血中的不同群体的T淋巴细胞进行鉴别和计数,比如γδ T细胞、CD3+ T细胞、CD8+ T细胞(CTL)、CD4+ T细胞(Th)、调节性T(Treg)细胞等。其中CD8+ T细胞被病毒或肿瘤抗原激活以后,可以清除被细菌或病毒感染的细胞或者发生基因突变的癌细胞;而CD4+ T细胞的主要作用,一方面可以辅助CD8+ T细胞进行肿瘤细胞或病毒感染细胞的杀伤和清除,另一方面可以分泌一些细胞因子来激活CD8+ T细胞,间接杀伤被病毒或细菌感染的细胞。通过趋化因子受体7(CCR7)和CD45RA,可以将经典的T细胞定义为初始T细胞(Naïve,CCR7+CD45RA+)、中央记忆T细胞(CM,CCR7+CD45RA-)、效应记忆T细胞(EM,CCR7-CD45RA-)和终末分化效应记忆T细胞(TEMRA,CCR7-CD45RA+)。

    单核细胞是外周血免疫细胞中不可或缺的一部分,介导宿主抗微生物防御,并且还涉及许多炎性疾病,包括动脉粥样硬化。此外,单核细胞样细胞可以募集到肿瘤部位并抑制肿瘤特异性免疫防御机制。

    本文使用j9游会真人游戏第一品牌医学 SFLO全光谱流式细胞仪分析人外周血样本中的淋巴细胞和单核细胞。本文的11色panel主要对CD4+ T细胞和CD8+ T细胞及相关亚群、调节性T细胞(Treg)、γδ T细胞和单核细胞进行分析。


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    应用方案


    仪器配置

    SFLO3全光谱流式细胞仪(三激光)

    激光器:405nm、488nm、635nm


    Panel设计

    人外周血T/单核细胞亚群分型(11色)方案标志物如下表所示。

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    逻辑圈门

    此panel从SSC/CD45+淋巴细胞门(未展示)开始分析,如图1所示,CD3+TCRγδ+的细胞群为γδ T细胞。CD3+的细胞群为T细胞,进一步通过CD4和CD8标志物的表征,可以有效区分为CD4+ T细胞(Th细胞)、CD8+ T细胞(CTL细胞)以及DNT细胞(CD4-CD8-)。根据表面标志物CD45RA和CCR7,可将CD4+/CD8+ T细胞分为初始(Naïve,CD45RA+CCR7+)、中央记忆(CM,CD45RA-CCR7+)、效应记忆(EM,CD45RA-CCR7-)以及末端效应记忆(TEMRA,CD45RA+CCR7-)细胞亚群。从SSC/CD45+单核细胞门(未展示)开始分析,用CD14和CD16来区分经典单核细胞(CD14+CD16-)、非经典单核细胞(CD14dimCD16+)以及中间型单核细胞(CD14+CD16+/Low)。

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    ▲图1. 人外周血T/单核细胞亚群分型(11色)方案圈门策略


    SFLO全光谱流式细胞仪可以在多色检测的同时,无需考虑通道之间的干扰,实现对细胞群体的精准免疫分型,分析细胞亚群之间的功能联系,以及对于大量样品进行高通量检测,适用于多种科研及临床场景,为不同的研究需求提供强有力的工具,在免疫、血液病、癌症研究、感染免疫研究等多个领域有着广泛的应用前景。

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