更新时间：
2025-01-02
来源：
j9游会真人游戏第一品牌医学
浏览量：
23
CD4+ T细胞
CD4+ T细胞，也称为辅助T细胞（Th），通过促进B细胞产生中和抗体并激活其他免疫细胞（如CD8+ T细胞、NK细胞和巨噬细胞），在针对病原体的适应性免疫反应中发挥核心作用。自1986年Mosmann等发现Th1、Th2亚群后，其他科学家又陆续发现了Th3、Treg、Tr1、Tfh、Th17、Th9和Th22等Th细胞亚群，这些细胞亚群之间相互协调，共同发挥免疫调节作用，维持机体稳态。由于Th细胞亚群比例及功能异常往往指示着疾病的发生，例如机体感染、炎症反应、肿瘤、HIV、自身免疫性疾病以及过敏性疾病等，因此为了了解疾病的发病机制，实现准确的疾病诊断和免疫功能的评估，分析每个Th细胞亚群的功能非常重要。
▲图1. CD4+ T细胞发育及其在免疫中的功能亚群[1]
本文使用j9游会真人游戏第一品牌医学 SFLO全光谱流式细胞仪，分别通过绘制CD69和各种细胞因子（IFNγ、IL-2、IL-4、IL-17、IL-21、TNF-α）、趋化因子受体（CD183、CD185、CD196、CD197）和免疫检查点分子（CD278、CD279）的二维扩展图来分析经PMA/Ionomycin mixture刺激的T细胞亚群的激活情况，并使用SFLO自带的CytoPysual软件进行手动圈门分析。
应用方案
仪器配置
SFLO3全光谱流式细胞仪（三激光）
激光器：405nm、488nm、635nm
Panel设计
人外周血Th细胞亚群分型（三激光19色）方案标志物如下表所示，方案中包括了白细胞、总T细胞、CD4+ T细胞、CD8+ T细胞的特征标志物以及细胞因子、趋化因子受体。
逻辑圈门
如图2所示，此panel通过FSC-A/H去除粘连细胞，在SSC/FSC图中圈出淋巴细胞门，再通过死活染料圈出活细胞群。淋巴细胞可以根据CD3表达区分出T细胞。T细胞进一步通过CD4和CD8标志物的表征，可以有效区分出CD4+ T细胞、CD8+ T细胞，进一步通过CD45RA分出CD4+ 记忆T细胞和CD8+ 记忆T细胞。在CD4+ T细胞亚群中，可以根据CD69的表达评估CD4+ T细胞的激活程度。此外，通过绘制CD69和各种细胞因子（IFNγ、IL-2、IL-4、IL-17、IL-21、TNF-α）、趋化因子受体（CD183、CD185、CD196、CD197）和免疫检查点分子（CD278、CD279）的二维散点图来分析每个T细胞亚群的激活情况。
▲图2. 人外周血Th细胞亚群分型（三激光19色）方案圈门策略
本文使用j9游会真人游戏第一品牌医学 SFLO全光谱流式细胞仪分析经PMA/Ionomycin mixture刺激的新鲜肝素钠全血。该方案旨在评估人类CD4+ T细胞反应，可在使用非人类灵长类动物模型的非临床研究以及涉及人类的临床研究中使用。
参考文献
[1] Amrita B,Ganesan R,Gabriella A, et.al. Differentiation and Regulation of TH Cells: A Balancing Act for Cancer Immunotherapy.Front. Immunol., 03 May 2021.
VIP咨询通道
公众号
